使用 abberior STAR RED 鬼笔环肽对小鼠内耳毛细胞进行肌动蛋白染色。

样品由德国 UMG Göttingen InnerEarLab 的 Christian Vogl 博士制备。<​​/p>

样品由德国 UMG Göttingen InnerEarLab 的 Christian Vogl 博士制备。 p> 模块：激发激光器RAINBOW 检测STED 激光器 ZoomDescription描述

培养的哺乳动物细胞中的核孔复合物（绿色）、Tom20（红色）和波形蛋白（白色）。

透明成年大鼠肾脏样本的 2 色 2D STED 图像。所示为肾小球图像，显示去氧肾上腺素（红色） ，abberior STAR 635P）结构位于 Podocin 狭缝（绿色，AlexaFluor594）之间。

样品由 D. Unnersjö Jess 和 H.G. Blom @ KTH 斯德哥尔摩，瑞典制备。

培养的哺乳动物细胞中的 Tom20（红色）和高尔基体（蓝色）。

为什么我们只使用脉冲 STED 激光器

使用脉冲 STED，所有 STED 光子在产生冲击时立即发送到样品 - 在激发脉冲之后。这是 STED 光子在物理上有意义的唯一时间，因为 STED 光子可以在受激分子有时间以低分辨率自发发出荧光之前完成其工作。

当应用连续波 (cw) 时STED 光束、STED 光子相对于染料的寿命而言不必要地分散，并且它们中的大多数到达得太早或太晚。事实上，大多数 STED 光子在大多数受激分子已经发射时到达 - 它们在那里没有任何好处，只会造成伤害！

尽管有一些方法（主要基于寿命传感）来控制为了弥补 CW-STED 的物理缺陷，它们要么效果甚微，要么基于繁重的数学后处理。为了不影响物理 STED 性能并以最小的光剂量获得最佳分辨率，必须使用脉冲 STED 激光器。以这种方式记录的物理上优越的数据也是数学反卷积的更好的起点。

脉冲 STED @ 775 nm 最佳 STED 分辨率

775 nm 脉冲纳秒 STED 激光。适用于荧光蛋白（例如 mCherry）的超分辨率成像以及有机染料成像（例如 abberior STAR RED）分辨率低至 20 nm；典型分辨率 < 30 nm

脉冲 STED @ 595 nm 顶级活细胞成像

595 nm 脉冲纳秒 STED 激光. 适用于荧光蛋白（例如 GFP、YFP）的超分辨率成像以及有机染料（例如 abberior）的成像STAR 440L 或 STAR 488。分辨率低至 25 nm；典型分辨率 < 40 nm

脉冲 STED 激光器提供最佳分辨率脉冲 STED 激光器可减少光剂量显着地使用脉冲激光将 STED 光仅放置在需要的地方：在染料的荧光寿命期间！因为之后，它只会造成伤害。脉冲 STED 激光器的性能优于连续波激光器，无一例外。您知道简单的规则是有效的！

为什么我们通常在显微镜中推荐 APD，为什么我们不担心所谓的较低动态范围？

拥有太多光子从来都不是问题。因此，具有最高量子效率的探测器始终是最好的选择，例如在 MATRIX 数组中。

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3D-STED 和像差控制，简单的方法

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